高保真与保真-快速扩增嵌合酶是分子克隆、定点突变与 NGS 建库的入口试剂,保真度倍数、延伸速度与片段上限是三条主指标。进口端中国市场在售价(检索 2026-09-28):NEB Q5 Hot Start 100 U ¥1,283;Thermo Phusion 500 U ¥2,283;Platinum SuperFi II 100 次 ¥593;PrimeSTAR GXL 250 U ¥1,202。国产端:诺唯赞 Phanta Max 官网 ¥618 起、高校中标价 500 U ¥1,200;ABclonal 高保真预混液 1 mL ¥480,约为进口同规格的 1/2–2/3。常规克隆保真段位国产可直接替代;30–40 kb 长片段与 >300 倍超高保真段位仍以 PrimeSTAR GXL、KOD FX Neo、SuperFi II 为主。渠道(ebaiao.cn)无聚合酶品类在售,仅 6 个 PCR 上下游配套 SKU 可衔接。
高保真 DNA 聚合酶的"高保真"来自 B 族聚合酶的 3'→5' 核酸外切酶(校读)活性,能在延伸中即时切除错配碱基;第一代代表是Pfu(Pyrococcus furiosus)等强校正天然酶——保真但慢、产量低、对抑制剂敏感。Thermo 对 Phusion 的官方参数仍以 Pfu 为参照系:"错配率比 Taq 低 50 倍、比 Pfu 低 6 倍"(HF 缓冲液中错配率 4.4×10⁻⁷)厂商宣称[1]。
保真-快速扩增嵌合/融合酶是工程化第二代:在保留校读活性的 B 族聚合酶骨架上融合持续合成能力/DNA 结合结构域,一次结合可复制更长的模板,从而同时获得高保真与快延伸。公开资料口径:Phusion 由芬兰 Finnzymes 开发(2010 年被 Thermo Fisher 收购),为聚合酶结构域融合 Sso7d 类 DNA 结合结构域的代表;翌圣明确其 Canace 系列"基于 Pfu DNA 聚合酶经基因工程改造"[12];Q5 Hot Start 采用核酸适配体(aptamer)热启动,可在室温建体系[3]。各家的骨架来源、结构域与缓冲液配方即其核心知识产权(见第五节)。
| 产品(厂商) | 保真度(vs Taq) | 延伸速度 | 片段上限 | GC/AT/抑制剂耐受 | 热启动 |
|---|---|---|---|---|---|
| Q5 / Q5 Hot Start(NEB) | 约 280 倍厂商宣称[4] | 快速扩增(NEB 口径"极速 PCR")具体 s/kb 值未确认(官网 403,间接来源) | 未确认(页面受限) | 宣称高/低 GC 模板均适配厂商宣称[3] | 核酸适配体(aptamer),室温可建体系[3] |
| Phusion(Thermo) | 52 倍(错配率比 Taq 低 50 倍、比 Pfu 低 6 倍;HF 缓冲液 4.4×10⁻⁷)厂商宣称[1] | 15–30 s/kb[1] | ≤20 kb[1] | 高 GC 扩增能力"高"(另配 GC 缓冲液)[1] | 本 SKU 无热启动(另有 Hot Start II 版) |
| Platinum SuperFi II(Thermo/Invitrogen) | >300 倍厂商宣称[2] | 快速循环方案(高持续合成能力)[2] | ≤20 kb[2] | 无需助熔剂可扩增高至 75% GC(>75% 建议加 5% DMSO);工程化增强对 PCR 抑制剂抗性,可扩纯度不佳样品[2] | 专有抗体介导,通用退火温度 60℃[2] |
| PrimeSTAR GXL(Takara) | "非常高的准确性"(具 3'→5' 校读;官方页未给倍数)厂商宣称[5] | 标准 1 min/kb;2 倍酶量下 10 s/kb 高速 PCR[5] | 人基因组 ≥30 kb[5] | GC rich 靶标无需更换缓冲液即可高效扩增;模板许可量大幅扩展(高浓度 cDNA 可用)[5] | 单克隆抗体[5] |
| PrimeSTAR Max(Takara) | 同上(官方页未给倍数)[6] | 约 5 s/kb(官方称"世界最快级")厂商宣称[6] | 页面未列(相关资料链接) | 预混液(含 dNTP/Mg²⁺) | 单克隆抗体[6] |
| KOD FX Neo(Toyobo) | 约 10 倍厂商宣称(经销页转述)[15] | 长片段建议 60 s/kb;含延伸增强剂提升持续合成与延伸速率[15] | 人基因组达 40 kb厂商宣称(经销页转述)[15] | 对粗样本抑制剂耐受强:组织裂解物、微生物细胞、食品/环境提取物可直接作模板[15] | 抗体介导[15] |
| KAPA HiFi / HiFi HotStart(Roche) | 错误率 2.8×10⁻⁷(NGS 法),约比 Taq 低 100 倍厂商宣称(经销页转述)[8] | 官方称"节省 75% 以上时间",固有高持续合成能力厂商宣称[8] | 基因组 DNA 15 kb;质粒/噬菌体 18–20 kb[8] | GC/AT 富集片段扩增能力显著提高[8] | 抗体介导(HotStart 版)[8] |
| Phanta Max(诺唯赞,国产) | 128 倍(二代测序法测定)厂商宣称[9] | 30 s/kb[9] | 页面未给明确上限未确认 | 可扩 GC>68% 片段;对抑制剂耐受较强,多种粗品样本可直接 PCR[9] | 高特异性热启动(机制未披露;含延伸因子/特异性促进因子)[9] |
| Hieff Canace Plus(翌圣,国产) | 83 倍 Taq / 9 倍 Pfu厂商宣称[12] | 标准 30 s/kb,极限低至 10 s/kb[12] | 最长 13 kb(加延伸因子)[12] | 优化缓冲液适配复杂模板(案例 57% GC 质粒 5.5 kb)[12] | 两种单克隆抗体(同时封闭聚合与校读活性)[12] |
| 臻心扩 Hi-sincere PCR mix CW3419(康为世纪,国产) | 约 300 倍厂商宣称(厂商稿转述)[14] | 简单模板约 10 s/kb;复杂基因组 20–30 s/kb[14] | 页面未给未确认 | GC 60–80%、AT 60–75%;人血/鼠尾/水稻粗裂解物可直接扩增[14] | 全预混室温放置 24 h 性能不变厂商宣称[14] |
| 厂商 | 代表产品 | 可核实要点 | 可靠性 |
|---|---|---|---|
| NEB(纽英伦) | Q5 / Q5 Hot Start(M0491/M0493) | 保真度约 280× Taq(厂商宣称)[4];aptamer 热启动室温建体系;Q5 Hot Start 100 U 中国授权代理商城价 ¥1,283/目录价 ¥1,509[3];另有 NEBNext 超保真 2X 预混液(NGS 建库线) | ★高 代理挂牌价+官网摘要 |
| Thermo Fisher(赛默飞) | Phusion(F530 系)、Platinum SuperFi II(12361010 等) | Phusion:52×、15–30 s/kb、≤20 kb、双缓冲液(HF/GC)[1];SuperFi II:>300×、≤20 kb、60℃ 通用退火、抑制剂抗性[2];中国官网直售价公开(见第三节) | ★高 官方中国站在线价 |
| Takara(宝生物) | PrimeSTAR GXL(R050)、PrimeSTAR Max(R045) | GXL:人基因组 ≥30 kb、GC rich 免换缓冲液、抗体热启动,日本官网 R050A 250 U ¥41,000 日元税前(促销 ¥32,800 至 2026-09-30)[5];Max:约 5 s/kb(厂商宣称)[6];中国经销挂牌价 R050A ¥1,202[7] | ★高 官方日本目录价+中国经销挂牌 |
| Toyobo(东洋纺) | KOD FX Neo(KFX-201) | 粗样本直接 PCR(组织裂解物/食品/环境提取物)、人基因组 40 kb 级长片段(厂商宣称,经销页转述)、抗体热启动(厂商宣称)[15];中国价格未确认 | ★中 经销页转述 |
| Roche(罗氏,KAPA) | KAPA HiFi / HiFi HotStart ReadyMix(KK2102/KK2602) | NGS 法错误率 2.8×10⁻⁷(约 100× Taq)、基因组 15 kb、抗体热启动(经销页转述)[8];KK2602 6.25 mL(500 反应)中国经销页促销未标价未确认 | ★中 经销页转述、价格未确认 |
| 厂商 | 代表产品 | 可核实要点 | 可靠性 |
|---|---|---|---|
| 诺唯赞(Vazyme,南京,688105) | Phanta Max Super-Fidelity DNA Polymerase(P505-d1/d2/d3) | 128× Taq(NGS 法)(厂商宣称)、30 s/kb、GC>68%、粗品直接 PCR、平末端[9];官网 ¥618 起(100 U);高校采购公示成交价:P505-d2 500 U ¥1,200(2026-05-26)[10]、P505-d3 ¥2,500(2026-07-16)[11]——高保真酶进入高校课题组常态化采购 | ★高 官网标价+两笔中标/竞价公示 |
| 翌圣生物(Yeasen,上海) | Hieff Canace® Plus(10153ES10/60/76/80) | 83× Taq / 9× Pfu(厂商宣称)、30 s/kb(极限 10 s/kb)、≤13 kb、双单抗热封闭聚合与校读活性、基于 Pfu 骨架工程改造[12];另有 Hieff Canace Gold 等;价格未确认(官网未展示) | ★高 官网参数(价格为空) |
| 康为世纪(CWBIO,北京,688426) | 臻心扩® Hi-sincere PCR mix(CW3419) | 约 300× Taq(厂商宣称,厂商稿转述)、简单模板 10 s/kb/复杂 20–30 s/kb、GC 60–80%、AT 60–75%、粗裂解直接扩增、预混室温 24 h 稳定[14];价格未确认;另有 Cobuddy 超保真快速 DNA 聚合酶(渠道标题级存在证据) | ★中 厂商稿转述 |
| 爱博泰克(ABclonal,武汉) | Gloria Nova HS 2X Master Mix V2(RM20399) | 归入高保真 PCR 类别的热启动预混液;官网公开标价 1 mL ¥480、5×1 mL ¥1,200[13];保真度倍数/速度/片段上限页面未公示未确认 | ★高 官网公开标价 |
| 近岸蛋白(Novoprotein,苏州,688137) | KOF High-Fidelity DNA Polymerase | 丁香通在售条目标题级存在证据(详情页因来源受限未取得正文),货号/参数/价格均未确认[16] | ★低 标题级 |
规则:公开价写具体金额并注明币种/规格/报价时点/市场;询价制一律写"未确认(询价制)",不估算、不折算、不做跨币种换算。中国市场为人民币报价,检索时点 2026-09-28。
| 产品(厂商,进口/国产) | 规格(货号) | 标价 | 市场 | 来源性质 |
|---|---|---|---|---|
| Q5 Hot Start(NEB,进口) | 100 U(M0493S) | 商城价 ¥1,283/目录价 ¥1,509 | 中国 | ★高 授权代理挂牌价[3] |
| Phusion(Thermo,进口) | 100 U(F530S) | 网上价 ¥576/目录价 ¥823 | 中国 | ★高 官方中国站在线价(有效期至 2026-12-31)[1] |
| Phusion(Thermo,进口) | 500 U(F530L) | 网上价 ¥2,283/目录价 ¥3,261 | 中国 | ★高 官方中国站在线价[1] |
| Phusion(Thermo,进口) | 2,000 U(F-530XL) | 网上价 ¥7,288/目录价 ¥10,412 | 中国 | ★高 官方中国站在线价[1] |
| Platinum SuperFi II(Thermo,进口) | 100 反应(12361010) | 网上价 ¥593/目录价 ¥2,008 | 中国 | ★高 官方中国站在线价(有效期至 2026-12-31)[2] |
| Platinum SuperFi II(Thermo,进口) | 500 反应(12361050) | 网上价 ¥2,723/目录价 ¥9,214 | 中国 | ★高 官方中国站在线价[2] |
| Platinum SuperFi II(Thermo,进口) | 5×500 反应(12361250) | 网上价 ¥11,613/目录价 ¥38,711 | 中国 | ★高 官方中国站在线价[2] |
| PrimeSTAR GXL(Takara,进口) | 250 U(R050A) | 市场挂牌价 ¥1,202 | 中国 | ★中 经销商挂牌价[7] |
| PrimeSTAR GXL(Takara,进口) | 250 U(R050A) | ¥41,000 日元税前(促销 ¥32,800,2026/07/01–09/30) | 日本 | ★高 官方日本目录价[5] |
| PrimeSTAR Max(Takara,进口) | 100 次(R045A) | ¥35,000 日元税前(促销 ¥28,000) | 日本 | ★高 官方日本目录价[6];中国价未确认 |
| KAPA HiFi HotStart ReadyMix(Roche,进口) | 6.25 mL/500 反应(KK2602) | 未确认(经销页促销未标价) | 中国 | ★中 参数可证、价格未确认[8] |
| KOD FX Neo(Toyobo,进口) | 200 反应(KFX-201) | 未确认(经销询价制) | 中国 | ★中 参数可证、价格未确认[15] |
| Phanta Max(诺唯赞,国产) | 100 U(P505-d1) | 官网 ¥618 起("具体价格咨询当地业务员") | 中国 | ★高 官网标价起点[9] |
| Phanta Max(诺唯赞,国产) | 500 U(P505-d2) | 成交价 ¥1,200(2026-05-26 高校课题组线上单公示) | 中国 | ★高 采购公示[10] |
| Phanta Max(诺唯赞,国产) | P505-d3(规格公告未列明) | 成交价 ¥2,500(2026-07-16 高校竞价公示) | 中国 | ★高 竞价公示[11] |
| Hieff Canace Plus(翌圣,国产) | 10/100/500/1,000 U(10153ES 系) | 未确认(官网未展示价格) | 中国 | ★中 规格可证、价格未确认[12] |
| Gloria Nova HS 2X Master Mix V2(ABclonal,国产) | 1 mL/5×1 mL(RM20399) | ¥480/¥1,200 | 中国 | ★高 官网公开标价[13] |
| 臻心扩 Hi-sincere PCR mix(康为世纪,国产) | CW3419 | 未确认 | 中国 | ★中 厂商稿转述、无价格[14] |
| KOF High-Fidelity(近岸蛋白,国产) | 未确认 | 未确认 | 中国 | ★低 标题级存在证据[16] |
| 级别 | 环节 | 判断 | 依据 |
|---|---|---|---|
| 可直接替代 公开在售、有参数、有价格或采购公示 |
常规分子克隆/定点突变/菌落 PCR 鉴定的高保真扩增(≤13 kb、常规 GC) | 诺唯赞 Phanta Max(128×、30 s/kb、粗品直扩,官网标价+高校采购公示常态化)、翌圣 Canace Plus(83×、双单抗热启动)参数完整公开;国产平末端产物特性与进口一致,克隆流程无缝切换 | [9][10][11][12]★高 |
| 预混液(master mix)形态的日常高通量克隆筛查 | ABclonal Gloria Nova HS 2X MM V2 官网 ¥480/1 mL 公开标价;预混形态减少加样误差,国产性价比明确(对 SuperFi II 约 1/2–2/3) | [13]★高(保真度数值未公示,切换前需平行验证) | |
| 需验证 宣称可达,缺同条件第三方数据 |
超高保真段位(>280× 口径) | 进口有 Q5 280×、SuperFi II >300× 口径;国产康为世纪臻心扩宣称约 300×(厂商稿转述,无公开第三方复核)。替换前须用同一靶标做克隆测序法错误率对比,不能以倍数宣称直接换算 | [2][4][14] |
| 20–40 kb 长片段人基因组扩增 | PrimeSTAR GXL(≥30 kb)与 KOD FX Neo(40 kb 级,厂商宣称)是该段位公开口径;国产公开上限集中在 13 kb(翌圣)与未公示(诺唯赞/康为世纪),未见同段位公开对标数据 | [5][15][12] | |
| GC/AT rich 与粗样本直扩的边界场景 | 国产宣称已覆盖 GC 60–80%/AT 60–75% 与粗裂解直扩[14],与 SuperFi II(75% GC 免助熔剂)宣称相当,但均为厂商宣称口径,逐项目验证为准 | [2][14] | |
| 短期无解 | NGS 文库/测序生态捆绑的专用聚合酶(KAPA 文库建库线、NEBNext 超保真预混液等) | 这类 SKU 与各家测序/文库试剂盒方案(片段化、接头、扩增循环数)深度绑定,替换即变更整个建库流程,属生态绑定而非单品性能问题 | [8]推论 |
| 极端长片段(>30 kb 人基因组)+ 高保真 + 粗样本三重要求叠加的场景 | KOD FX Neo 的 40 kb 级粗样本直扩组合能力国产未见公开对标;该段位叠加了骨架工程、延伸因子与缓冲液三重 know-how | [15]国产对标缺失 |
| 品牌(身份) | 产品 | SKU | 标价(快照 2026-08-27) | 详情页 |
|---|---|---|---|---|
| 昂景生物 OnGene(渠道合作) | 产物纯化试剂盒(100)——PCR 产物后处理衔接 | 006-01-100S | 未确认(渠道询价制) | product/1009 |
| 莫纳生物 Monad(渠道合作) | PCR 体系构建及扩增自动化工作站——体系自动配液 | MONAD-WS-PCR-BUILD | 未确认(渠道询价制) | product/1052 |
| 莫纳生物 Monad(渠道合作) | PCR 产物纯化自动化工作站 | MONAD-WS-PCR-PURIFY | 未确认(渠道询价制) | product/1053 |
| Azenta(渠道代理) | FrameStar 96 孔半裙边 PCR 板 | 4ti-0901 | 未确认(渠道询价制) | product/811 |
| Azenta(渠道代理) | 单支 PCR 管,带连盖 | 4ti-0790 | 未确认(渠道询价制) | product/734 |
| 东宸柏奥(自产品牌) | qPCR 高黏高透膜 DC793S——PCR/qPCR 封膜配套(东宸柏奥自产封板膜线) | DC793S | 未确认(渠道询价制) | product/960 |
渠道含义:本渠道目前可承接 PCR 工作流的耗材与自动化配套(PCR 板管、封板膜、产物纯化试剂盒与工作站),聚合酶试剂本体不在售。对客户提问的标准答复应是:酶需从厂商/授权代理采购,但 PCR 体系构建、产物纯化与封板耗材可以在这里一站配齐。
第一,高保真酶已经是"默认选项"而不再是大额预算项:SuperFi II 100 次网上价 ¥593、国产 100 U ¥618 起[2][9],日常克隆用高保真酶的成本已低于一次 Sanger 测序返工——还在用普通 Taq 做要测序的克隆,是当下实验室最不划算的操作。第二,切酶要先改流程再换酶:本类酶几乎全部产平末端、不含 dU 兼容性(国产备有专用型号)、对引物 Tm 要求偏高(KOD 系 >63℃),换酶不换引物与克隆方案是常见的翻车原因[9][15]。第三,别把厂商倍数当合同指标:280×、300×、128×、83× 全是厂商宣称且方法不一,关键项目应自带克隆测序质控,规格书里写错误率与测定方法而非倍数[1][8][9]。第四,长片段与粗样本直扩仍是进口强项:≥30 kb 人基因组(PrimeSTAR GXL)与组织裂解物直扩(KOD FX Neo)的公开口径国产暂未对标,做基因组大片段覆盖、现场样/食品环境样检测的实验室半年内不必等国产[5][15]。第五,预算节奏上盯促销窗口:赛默飞网上价有效期至 2026-12-31、Takara 日本站促销至 2026-09-30、NEB Q5 有捆绑 66 折促销线索[1][5][4],大包装采购择期下单可省 30%–70%。
| 判断 | 方向 | 依据与置信度 |
|---|---|---|
| 国产向 300× 级宣称段位集中上探,出现更多对标 Q5/SuperFi II 的新 SKU 与公开参数 | ↗ 中置信 | 康为世纪已发布约 300× 宣称产品(2026-03 厂商稿)[14];诺唯赞、翌圣已有 128×/83× 公开口径,头部国产品牌参数跟进是竞争传导的自然路径推论 |
| 进口厂商中国端线上价格战延续,目录价进一步失去参考意义 | ↗ 高置信 | 赛默飞网上价对目录价打到 3–7 折且挂至 2026-12-31[1][2];NEB 有 Q5 捆绑 66 折促销线索[4] |
| 常规克隆段位国产份额继续扩大,采购公示中高保真酶国产条目常态化 | ↗ 高置信 | 2026 年 5–7 月已有两笔高校公示的诺唯赞 Phanta Max 成交[10][11];价格约进口 1/2 且参数公开 |
| 长片段(≥30 kb)与 NGS 文库专用段位进口维持独占,国产半年内难有公开验证对标 | → 高置信 | 国产公开片段上限集中在 13 kb 段[12];文库酶生态绑定建库流程(证据缺失即不做乐观推断) |
| 预混液与自动化配液绑定成为新竞争维度(酶+工作站打包) | ↗ 中置信 | 渠道内 Monad PCR 体系构建工作站、产物纯化工作站 SKU 的存在印证工作流自动化需求[17]推论 |
| 本渠道是否引入聚合酶品类 | ✕ 不看好半年内发生 | 截至核对日 2026-09-28 零 SKU;酶类需冷链与技术支持能力,渠道现有试剂线仅提取/纯化[17] |
星级说明:★高 高=官方文件/一手数据/中标公示/企业公开价目/渠道在售商品页;★中 中=行业研究/二手转述/受限来源的交叉印证;★低 低=媒体转引/标题级/未确认。
本期有效来源统计:独立来源条目 17 条;其中 ★高 高可靠 11 条、★中 中可靠 5 条、★低 低可靠 1 条;高+中合计 16 条,满足"≥6 条有效来源、高或中 ≥3 条"的门槛。但市场份额类结论因无公开统计而被主动收缩,全部保真度/速度/片段上限数字均为厂商宣称口径,价格均为检索当日挂价快照。